Um esquema rápido e de volume variável de carregamento de amostras para eletroforese não-aquosa em microchip com fluorescência induzida a laser (NAMCE-LIF) foi desenvolvido, incluindo um plugue de polímero poroso, uma bomba de microvácuo de baixo custo e uma fonte de alta tensão com potencial único. O plugue de polímero poroso foi fabricado dentro do canal de separação como uma válvula de seleção, que impedia o tampão de corrida do reservatório de descarte de tampão (BW) de fluir de volta ao canal de separação, mas permitia a migração eletroforética ao longo do canal de separação. Aplicando uma pressão subatmosférica ao headspace do reservatório de descarte (SW), amostra e tampão de corrida eram passados imediatamente ao SW. Concomitantemente, uma parte do fluxo de amostra era conduzido através do plugue de polímero poroso pela força elétrica, formando uma zona de amostra no canal de separação. O comprimento da zona de amostra injetada era proporcional ao tempo de injeção. O método proposto foi aplicado com sucesso na separação de Rodamina 123 (Rh123) e Rodamina 6G (Rh6G). Os limites de detecção para Rh123 e Rh6G baseados em S/N = 3 foram 0,63 e 0,48 nmol L- 1, respectivamente. O sistema provou possuir um potencial para aperfeiçoamento de rendimento, repetibilidade, sensibilidade, desempenho da separação da eletroforese não aquosa em microchip e uma ampla gama de aplicações.
A rapid and variable-volume sample loading scheme for nonaqueous microchip electrophoresis with laser induced fluorescence detection (NAMCE-LIF) was developed, which included a porous polymer plug, a low-cost microvacuum pump, and a single potential supply. The porous polymer plug was fabricated within the separation channel as a select valve, which prevented the running buffer from buffer waste reservoir (BW) flowing back into the separation channel, but allowed electrophoretic migration along the separation channel. By applying a subatmospheric pressure to the headspace of sample waste reservoir (SW), sample and running buffer were drawn immediately to SW. At the same time, a branch of the sample stream was driven across the porous polymer plug by the electric force and formed a sample zone in the separation channel. The injected sample zone length was in proportion with the injection time. The proposed method was successfully applied to separation of Rhodamine 123 (Rh123) and Rhodamine 6G (Rh6G). The limits of detection for Rh123 and Rh6G based on S/N = 3 were 0.63 and 0.48 nmol L- 1, respectively. The system has been proved to possess an exciting potential for improving throughput, repeatability, sensitivity, separation performance of nonaqueous microchip electrophoresis and a wide range of applications.
